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        原代細胞培養
        BSP甲基化測序

        時間:2021-03-05 瀏覽:1947次

        BSP甲基化測序

        亞硫酸氫鹽處理后測序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法是檢測基因甲基化的經典方法,其原理為:用亞硫酸氫鈉修飾處理基因組DNA,所有未發生甲基化的胞嘧啶(C)被轉化為尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶則不變。

        基因組DNA經亞硫酸鹽處理后,設計BSP引物擴增目的片段,此時尿嘧啶(U)全部轉化為胸腺嘧啶(T),最后對PCR產物進行測序就可以判斷CpG位點是否發生甲基化。

         

        技術優勢

        (1) 檢測序列長,可長達200-400bp

        (2) 分辨率高,可檢測到每一個堿基的甲基化狀況

        (3) 對于樣品要求低,適用于新鮮、冷凍和FFPE樣本

         

        服務內容

        1. 基因組DNABisulfite轉化;

        2. BSPBisulfite Sequencing PCR)法,包括引物設計與合成,TA克隆測序及數據分析。

         

        樣品要求

        (1) 若提供基因組DNA,需≥2μg

        (2) 若提供的材料為新鮮組織、血液、細胞等生物材料,請提供足夠提取2μg以上基因DNA的材料量

        (3) 基于所選擇的DNA甲基化檢測方法,請提供相應的引物或引物序列

         

        BSP服務完成時提供

        (1) Bisulfite處理的基因組DNA

        (2) 實驗報告(包括BSP產物的直接測序報告)

        (3) 5個有效的陽性克隆

        (4) 空點圖

         

        結果展示

        BSP測序圖

         

        BSP點狀圖和BSP序列比對

         

        BSP柱狀圖


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